摘要：本发明公开了一组同时定量检测落选短体线虫和桑尼短体线虫的引物组和探针，所述引物组包括引物对pnF/ pnR和引物对ptF/ ptR，所述探针为prbpn和prbpt。所述引物pnF/ pnR序列分别如SEQ ID NO.1和2所示，引物ptF/ ptR序列分别如SEQ ID NO.4和5所示；所述探针prbpn和prbpt序列分别如SEQ ID NO.3和6所示。利用上述引物组和探针建立的多重实时荧光PCR方法不仅能够特异的从混合线虫样品或基质中同时检测这两种线虫，有效克服工作量大和检测成本高的缺点，而且可达到单条线虫的检测灵敏度。同时，该方法还可对样品中这两种线虫进行定量分析，对实际检测工作有重要的推进意义。